來(lái)源:網(wǎng)絡(luò )資源 2022-04-29 21:56:59
雙縮脲試劑本是用來(lái)檢測雙縮脲,由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在堿性溶液中發(fā)生雙縮脲反應。當底物中含有肽鍵時(shí),試液中的銅與多肽配位,絡(luò )合物呈紫色?赏ㄟ^(guò)比色法分析濃度,在紫外可見(jiàn)光譜中的波長(cháng)為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/mL。
1雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)評價(jià)
優(yōu)點(diǎn):雙縮脲法測定蛋白質(zhì)的測定范圍是1~10mg蛋白質(zhì),操作簡(jiǎn)單、快捷。既適合手工操作,又適合自動(dòng)化分析,重復性好、線(xiàn)性關(guān)系好, 雙縮脲試劑可以長(cháng)期保存( 若貯存瓶中有黑色沉淀出現,則需要重新配制)。
缺點(diǎn):靈敏度差,測定范圍窄,樣品需要量大,不同的蛋白質(zhì)產(chǎn)生顏色的深淺相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精確的蛋白質(zhì)測定。干擾測定的物質(zhì)包括有:在性質(zhì)上是氨基酸或肽的緩沖液,如TrIs緩沖液,因為它們產(chǎn)生陽(yáng)性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時(shí)出現紅色沉淀。
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