顯微鏡的基本構造
光學(xué)顯微鏡由目鏡，物鏡，粗準焦螺旋，細準焦螺旋，壓片夾，通光孔，遮光器，轉換器，反光鏡，載物臺，鏡臂，鏡筒，鏡座，聚光器，光闌組成。
顯微鏡分類(lèi)
光學(xué)顯微鏡
通常皆由光學(xué)部分、照明部分和機械部分組成。無(wú)疑光學(xué)部分是最為關(guān)鍵的，它由目鏡和物鏡組成。早于1590年，荷蘭和意大利的眼鏡制造者已經(jīng)造出類(lèi)似顯微鏡的放大儀器。光學(xué)顯微鏡的種類(lèi)很多，主要有明視野顯微鏡(普通光學(xué)顯微鏡)、暗視野顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡、偏光顯微鏡、微分干涉差顯微鏡、倒置顯微鏡。
電子顯微鏡
電子顯微鏡有與光學(xué)顯微鏡相似的基本結構特征，但它有著(zhù)比光學(xué)顯微鏡高得多的對物體的放大及分辨本領(lǐng)，它將電子流作為一種新的光源，使物體成像。自1938年Ruska發(fā)明第一臺透射電子顯微鏡至今，除了透射電鏡本身的性能不斷的提高外，還發(fā)展了其他多種類(lèi)型的電鏡。如掃描電鏡、分析電鏡、超高壓電鏡等。結合各種電鏡樣品制備技術(shù)，可對樣品進(jìn)行多方面的結構 或結構與功能關(guān)系的深入研究。顯微鏡被用來(lái)觀(guān)察微小物體的圖像。常用于生物、醫藥及微小粒子的觀(guān)測。電子顯微鏡可把物體放大到200萬(wàn)倍。臺式顯微鏡,主要是指傳統式的顯微鏡,是純光學(xué)放大，其放大倍率較高，成像質(zhì)量較好，但一般體積較大,不便于移動(dòng),多應用于實(shí)驗室內,不便外出或現場(chǎng)檢測。
便攜式顯微鏡
便攜式顯微鏡,主要是近幾年發(fā)展出來(lái)的數碼顯微鏡與視頻顯微鏡系列的延伸。和傳統光學(xué)放大不同,手持式顯微鏡都是數碼放大,其一般追求便攜,小巧而精致,便于攜帶;且有的手持式顯微鏡有自己的屏幕,可脫離電腦主機獨立成像,操作方便,還可集成一些數碼功能,如支持拍照,錄像,或圖像對比,測量等功能。
數碼液晶顯微鏡，最早是由博宇公司研發(fā)生產(chǎn)的，該顯微鏡保留了光學(xué)顯微鏡的清晰，匯集了數碼顯微鏡的強大拓展、視頻顯微鏡的直觀(guān)顯示和便攜式顯微鏡的簡(jiǎn)潔方便等優(yōu)點(diǎn)。
掃描隧道顯微鏡
掃描隧道顯微鏡亦稱(chēng)為“掃描穿隧式顯微鏡”、“隧道掃描顯微鏡”，是一種利用量子理論中的隧道效應探測物質(zhì)表面結構的儀器。它于1981年由格爾德·賓寧(G.Binning)及海因里希·羅雷爾(H.Rohrer)在IBM位于瑞士蘇黎世的蘇黎世實(shí)驗室發(fā)明，兩位發(fā)明者因此與恩斯特·魯斯卡分享了1986年諾貝爾物理學(xué)獎。
它作為一種掃描探針顯微術(shù)工具，掃描隧道顯微鏡可以讓科學(xué)家觀(guān)察和定位單個(gè)原子，它具有比它的同類(lèi)原子力顯微鏡更加高的分辨率。此外，掃描隧道顯微鏡在低溫下(4K)可以利用探針尖端精確操縱原子，因此它在納米科技既是重要的測量工具又是加工工具。
STM使人類(lèi)第一次能夠實(shí)時(shí)地觀(guān)察單個(gè)原子在物質(zhì)表面的排列狀態(tài)和與表面電子行為有關(guān)的物化性質(zhì)，在表面科學(xué)、材料科學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域的研究中有著(zhù)重大的意義和廣泛的應用前景，被國際科學(xué)界公認為20世紀80年代世界十大科技成就之一。
顯微鏡的使用方法
顯微鏡的使用
利用自然光源鏡檢時(shí)，最好用朝北的光源，不宜采用直射陽(yáng)光;利用人工光源時(shí)，宜用日光燈的光源。
鏡檢時(shí)身體要正對實(shí)習臺，采取端正的姿態(tài)，兩眼自然張開(kāi)，左眼觀(guān)察標本，右眼觀(guān)察記錄及繪圖，同時(shí)左手調節焦距，使物象清晰并移動(dòng)標本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時(shí)載物臺不可傾斜，因為當在五套載物臺傾斜時(shí)，液體或油易流出，既損壞了標本，又污染載物臺，也影響檢查結果。
鏡檢時(shí)應將標本按一定方向移動(dòng)視野，直至整個(gè)標本觀(guān)察完畢，以便不漏檢，不重復。
顯微鏡的重光為對光，接物鏡的轉換及光線(xiàn)的調節。觀(guān)察寄生蟲(chóng)標本時(shí)，光線(xiàn)調節甚為重要。因為所觀(guān)察的標本如蟲(chóng)卵、包囊等，均為自然光狀態(tài)的物體，有大有小，色澤有深有淺，有的無(wú)色透明，而低倍、高倍接物鏡轉換較多，故須隨著(zhù)鏡檢時(shí)對不同標本和要求，需要隨時(shí)調節焦距和光線(xiàn)，這樣才能使觀(guān)察的物象清晰。在一般情況下，染色標本光線(xiàn)宜強，無(wú)色或未染色標本光線(xiàn)宜弱;低倍鏡觀(guān)察光線(xiàn)宜弱，高倍鏡觀(guān)察光線(xiàn)宜強。
1. 對光
：(1)將低倍鏡轉至鏡筒下方與鏡筒成一直線(xiàn)。
(2)撥動(dòng)反光鏡，調節至視野最亮無(wú)陰影。反光鏡有平、凹兩面，光源強時(shí)用平面，較暗時(shí)用凹面，需要強光時(shí)，將聚光器提高，光圈放大;需要弱光時(shí)，將聚光器降低，或光圈適當縮小。
(3)將待觀(guān)察的標本置載物臺上，轉動(dòng)粗調節器使鏡筒下降至接物鏡接近標本。于轉動(dòng)粗調節器的同時(shí)，須俯身在鏡旁仔細觀(guān)察接物鏡與標本之間的距離。
(4)左眼于接目鏡觀(guān)察，同時(shí)左手轉動(dòng)粗調節，使鏡筒徐徐上升以調節焦距，使視野內的物象看到上時(shí)即停，再調微調節器，至標本清晰為止。
2. 接物鏡的使用及光線(xiàn)的調節：
顯微鏡一般具有三個(gè)接物鏡，即低倍、高倍及油鏡，固定于接物鏡轉換盤(pán)孔中。觀(guān)察標本時(shí)，先使用低倍接物鏡，此時(shí)，視野較大，標本較易查出，但放大倍數較小(一般放大100倍)，較小的物體不易觀(guān)察其結構。高倍接物鏡放大的倍數較大(一般放大400倍)，能觀(guān)察微小的物體或結構。
寄生蟲(chóng)的蠕蟲(chóng)卵，微絲蚴，原蟲(chóng)的滋養體及包囊，昆蟲(chóng)的幼蟲(chóng)，均使用低、高倍鏡。組織細胞內的原蟲(chóng)，則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀(guān)察，如在低倍鏡下不能準確鑒定所見(jiàn)的物體或其內部構造時(shí)，則轉高倍鏡觀(guān)察。使用油鏡觀(guān)察，一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進(jìn)行鏡檢觀(guān)察。
3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別：
(1)標明放大倍數10×，40×，100×，或10/0.25，40/0.65，100/1.25。
(2)低倍鏡最短，高倍鏡較長(cháng)，油鏡最長(cháng)。
(3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大，高倍鏡較大，油鏡最小。
(4)油鏡頭上�？逃泻谏h(huán)圈，或“油”字。
4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法：
(1)光線(xiàn)對好后，移動(dòng)推進(jìn)器尋找需要觀(guān)察的標本。
(2)如標本的體積較大，不能清楚查見(jiàn)其構造因而不能確認時(shí)，則將標本移至視野中央，再旋轉高倍接物鏡于鏡筒下方。
(3)旋轉微調節器至物象清晰為止。
(4)調節聚光器及光圈，使視野內的物象達到最清晰的程度。
5. 油鏡的使用方法：
(1)原理：使用油鏡觀(guān)察時(shí)，需加香柏油，因為油鏡需要進(jìn)入鏡頭的光線(xiàn)多，但油鏡的透氣孔最小，這樣進(jìn)入的光線(xiàn)就少，物體不易看清楚。同時(shí)又因自玻片透過(guò)的光線(xiàn)，由于介質(zhì)(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片：n=1.52，空氣：n=1.0)不同而發(fā)生了折射散光，因此射入鏡頭的光線(xiàn)就更少，物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質(zhì)如香柏油，加于標本與玻片之間，使光線(xiàn)不通過(guò)空氣，這樣射入鏡頭的光線(xiàn)就較多，物象就看得清楚。
(2)油鏡的使用：
a.將光線(xiàn)調至最強程度(聚光器提高，光圈全部開(kāi)放)。
b.轉動(dòng)粗調節器使鏡筒上升，滴香柏油1小滴(不要過(guò)多，不要涂開(kāi))于接物鏡正下方標本上。
c.轉動(dòng)接物鏡轉換盤(pán)，使油鏡頭于鏡筒下方。
d.俯身鏡旁側面在肉眼的觀(guān)察下，轉動(dòng)粗調節器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內，輕輕接觸玻片為止。
e.慢慢轉動(dòng)粗調節器，使油鏡頭徐徐上升至見(jiàn)到標本的物象為止。
f.轉動(dòng)微調節器，使視野物象達到最清晰的程度。
g.左手徐徐移動(dòng)推進(jìn)器，并轉動(dòng)微調節器以觀(guān)察標本。
h.標本觀(guān)察完畢后，轉動(dòng)粗調節器將鏡筒升起，取下標本玻片。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。
6. 注意事項：
(1)使用顯微鏡之前，應熟悉顯微鏡的各部名稱(chēng)及使用方法，特別應掌握識別三種接物鏡之特征。
(2)寄生蟲(chóng)學(xué)實(shí)習中所觀(guān)察的標本，大多數為無(wú)色和顏色較淺，因此必須注意光線(xiàn)的調節。
(3)新鮮標本觀(guān)察時(shí)，須加蓋玻片，以免標本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡，同時(shí)可使標本表面勻平，光線(xiàn)得以集中，有利于觀(guān)察。
顯微鏡的基本構造和使用方法經(jīng)典例題
將寫(xiě)有“生物”字樣的臨時(shí)玻片標本放在顯微鏡下觀(guān)察，正確操作應看到的圖像是
答案 :
D
請根據下圖回答相關(guān)問(wèn)題.
(1)圖①中，轉動(dòng)[ ]粗準焦螺旋時(shí)，鏡筒的升降范圍較大.
(2)臨時(shí)裝片的制作主要有擦片、滴液、取材、 蓋片、染色五步，圖②是其中的哪一步驟? ________
(3)制作人體口腔上皮細胞臨時(shí)裝片時(shí)，需要染色(如圖③)，通常所用的染液是________.
(4)圖④和圖⑤中，哪一幅是觀(guān)察班的人體口腔上皮細胞? ________.因為人體口腔上皮細胞沒(méi)有________ (寫(xiě)出一點(diǎn)即可).
(5)圖④中，在顯微鏡下看到的顏色最深的是細胞中的哪一結構? ________
答案 :
(1)6(2)蓋片(3)碘液(4)⑤細胞壁(5)細胞核
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