中考網(wǎng)整理了關(guān)于2021年中考生物知識點(diǎn)之：土壤中分解尿素的細菌的分離與計數，希望對同學(xué)們有所幫助，僅供參考。

　　土壤中分解尿素的細菌的分離與計數

　　尿素      是一種重要的農業(yè)氮肥，尿素并不能直接被農作物吸收。只有當土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為他們能合成脲酶

　　尿素最初是從人的尿液中發(fā)現的

　　篩選菌株

　�。�1）實(shí)驗室中微生物的篩選應用的原理

　　人為提供有利于目的菌株生長(cháng)的條件（包括營(yíng)養、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(cháng)。

　�。�2）選擇性培養基

　　在微生物學(xué)中，將允許特定種類(lèi)的微生物生長(cháng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(cháng)的培養基，稱(chēng)作選擇培養基。

　�。�3）配制選擇培養基的依據

　　根據選擇培養的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達到選擇的目的。例如，培養基中不加入有機物可以選擇培養自養微生物；培養基中不加入氮元素，可以選擇培養能固氮的微生物；加入高濃度的食鹽可選擇培養金黃色葡萄球菌等。

　　統計菌落數目

　�。�1）測定微生物數量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數。

　�。�2）稀釋涂布平板法統計樣品中活菌的數目的原理

　　當樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養基表面生長(cháng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活細菌。為了保證結果準確，一般設置3～5個(gè)平板，選擇菌落數在30～300的平板進(jìn)行計數，并取平均值。統計的菌落數往往比活菌的實(shí)際數目低，因此，統計結果一般用菌落數而不是活菌數來(lái)表示。

　　采用此方法的注意事項：1.一般選取菌落數在30~300之間的平板進(jìn)行計數

　　2.為了防止菌落蔓延，影響計數，可在培養基中加入TTC（在計數瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細菌菌落長(cháng)成紅顏色,對去除食品本底顆粒物干擾非常有意義）.

　　3.本法僅限于形成菌落的微生物

　　設置對照

　　設置對照的主要目的是排除實(shí)驗組中非測試因素對實(shí)驗結果的影響，提高實(shí)驗結果的可信度。對照實(shí)驗是指除了被測試的條件以外，其他條件都相同的實(shí)驗，其作用是比照試驗組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實(shí)是所測試的條件引起相應的結果。

　　實(shí)驗設計

　　實(shí)驗設計包括實(shí)驗方案，所需儀器、材料、用具和藥品，具體的實(shí)施步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。

　�。�1）土壤取樣：同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物，數量最大，種類(lèi)最多。在富含有機質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長(cháng)。從富含有機物、潮濕、pH≈7的土壤中取樣。鏟去表層土，在距地表約3～8cm的土壤層取樣。

　�。�2）樣品的稀釋?zhuān)簶悠返南♂尦潭葘⒅苯佑绊懫桨迳仙�長(cháng)的菌落數目。在實(shí)際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養，以保證獲得菌落數在30~300之間、適于計數的平板。

　　測定土壤中細菌的數量，一般選用104  105   106

　　測定放線(xiàn)菌的數量，一般選用103  104   105

　　測定真菌的數量，一般選用102  103    104

　�。�3）微生物的培養與觀(guān)察

　　不同種類(lèi)的微生物，往往需要不同的培養溫度和培養時(shí)間。細菌30~37℃ 1~2天

　　放線(xiàn)菌25~28℃ 5~7天 霉菌25~28℃ 3~4天

　　每隔24小時(shí)統計一次菌落數目，選取菌落數目穩定時(shí)的記錄作為結果，這樣可以防止因培養時(shí)間不足而導致一樓菌落的數目。一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度及培養時(shí)間），同種微生物表現出穩定的菌落特征。形狀、大小、隆起程度、顏色

　　疑難解答

　�。�1）如何從平板上的菌落數推測出每克樣品中的菌落數？

　　統計某一稀釋度下平板上的菌落數，最好能統計3個(gè)平板，計算出平板菌落數的平均值

　　每克樣品中的菌落數=（C/V）*M 其中，C代表某一稀釋度下平板上生長(cháng)的平均菌落數，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（ml），M代表稀釋倍數

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