來(lái)源:中考網(wǎng)整理 作者:中考網(wǎng)編輯 2018-05-14 21:43:55
基因工程中有著(zhù)非常關(guān)鍵的的一個(gè)步驟,就是把外源DNA插入載體分子以構建重組DNA?梢(jiàn)選擇一種運載基因的載體作媒介物是必要的,因為每種生物都具有很強的排他性,外源DNA單獨進(jìn)人受體細胞時(shí)必將被破壞,這就好比過(guò)河時(shí)必須用到船一樣。但是在培育轉基因動(dòng)物或植物時(shí),很多科學(xué)家卻把目光轉向了把目的基因直接導入核基因組的方法。為什么目的基因可直接導入呢,中國學(xué)者周光宇提出的“DNA片段雜交假說(shuō)”對此作出了很好的解釋。該假說(shuō)認為:外源DNA進(jìn)入受體細胞后,經(jīng)酶切和分解后形成的局部DNA分子,其在核苷酸序列上可能與受體DNA具有一定的親和性,并能粘附在母本DNA上,在復制時(shí)整合進(jìn)去實(shí)現DNA的片段雜交。目前這一假說(shuō)已被證實(shí),并出現一些將目的基因直接導入受體細胞的分子育種新方法,下面重點(diǎn)介紹比較常見(jiàn)的的三種方法。
1,基因槍法
基因槍法又稱(chēng)生物彈法或微粒槍法、微粒轟擊法,是依賴(lài)高速度的金屬顆粒將外源基因引入活體細胞的一種轉化技術(shù);驑尭鶕浼铀傺b置可分為火藥式、電動(dòng)式和氣動(dòng)式。其中火藥式基因槍的結構和一般軍事上的槍十分相似,它主要由滑膛槍、真空轟擊室和阻彈部件構成的,其操作的基本原理如下:火藥爆炸產(chǎn)生的驅動(dòng)力會(huì )推動(dòng)塑料彈丸高速運動(dòng),當彈丸運動(dòng)至彈膛里的金屬板時(shí),塑料彈丸的進(jìn)入會(huì )被阻止,但塑料彈丸前端攜帶有目的基因的微彈卻可以依靠慣性高速通過(guò)微孔,并擊中緊貼金屬板的靶細胞。因為微彈的體積非常細小,再加上射擊的速度非?,所以受到轟擊的細胞仍能保持正常的生物活性。而微彈上的外源DNA也隨之順利導入靶細胞,并整合到核染色體上得到表達,實(shí)現基因的轉化;驑尫ㄊ悄壳皣H上最先進(jìn)的基因導入技術(shù),它以操作簡(jiǎn)單迅速、基因用量少、對靶細胞要求低等優(yōu)點(diǎn)而備受科學(xué)工作者的青睞。
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